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在使用人elisa試劑盒前,這些要領(lǐng)一定要知道

發(fā)布時(shí)間: 2022-11-28  點(diǎn)擊次數: 867次
  人elisa試劑盒具有高效、快捷、易批量操作等優(yōu)點(diǎn),不同的廠(chǎng)家提供不同種類(lèi),不同類(lèi)型的Elisa試劑盒產(chǎn)品,為科研用戶(hù)帶來(lái)極大的方便。人elisa試劑盒能夠針對特定檢測源,制備特異性抗原抗體,根據應用需要量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。
 
  實(shí)驗原理:
  人elisa試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì),再與HRP標記的待測物質(zhì)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值),通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中待測物質(zhì)濃度。
 
  人elisa試劑盒的計算:
  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線(xiàn),根據樣品的OD值由標準曲線(xiàn)查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實(shí)際濃度。
 
  人elisa試劑盒在使用時(shí)的要領(lǐng):
  1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開(kāi)封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
  2、濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結果。
  3、各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間醉好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
  4、請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn),醉好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標準品孔第—孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時(shí)請醉后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
  5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  6、底物請避光保存。
  7、嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
  8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
  9、本試劑不同批號組分不得混用。
  10、如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準。

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