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動(dòng)物elisa試劑盒在檢測上有以下三種方法

發(fā)布時(shí)間: 2021-10-26  點(diǎn)擊次數: 878次
  動(dòng)物elisa試劑盒基本原理是在測定時(shí),受檢樣本與固相載體表面的抗原或抗體起反應,用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與溶液中的其他物質(zhì)分開(kāi),再加入酶標記的抗原或抗體,也通過(guò)反應結合在固相載體上,加入酶反應的底物后,底物被酶催化成有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中要檢測的目標物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據顏色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
 
  動(dòng)物elisa試劑盒的檢測方法:
  放射免疫法:以不同稀釋度的抗血清與優(yōu)質(zhì)符號抗原混合,孵育24h后,測定其結合率。一般以結合率為50%的血清稀度和為效價(jià)。如某抗血清的結合率為50%時(shí)的稀釋度為1:15000,則該血清的效價(jià)就是1:15000??寡宓男r(jià),除由抗血清自身的性質(zhì)決議外,還受符號抗原的質(zhì)量、孵育時(shí)刻,所用稀釋液的成分及其pH等要素的影響,在工作中有必要引起留意。
  動(dòng)物elisa試劑盒雙向分散法:使用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上分散,兩者在相交處發(fā)生沉積線(xiàn),以調查和判別抗血清中是否有抗體及其濃度。
  球脂板的制備:100ml pH7.1 的磷酸鹽緩沖液加到15g的瓊脂內,于水浴中加溫,攪拌,使瓊脂*溶解,趁熱用紗布過(guò)濾,待溶液冷卻到65℃左右時(shí),參加疊氮鈉,使其在溶液中的濃度為0.1%。用移液管把瓊脂放在潔凈平皿或玻片上,約3mm厚,待其冷卻,*凝固后,用打孔器打孔。中心孔內加適量抗原,周?chē)骺變确謩e參加50μl 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀釋的抗血清,37℃下孵育24h,調查有無(wú)沉積線(xiàn)發(fā)生,以判別血清的稀釋度。

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