發(fā)布時(shí)間： 2023-04-18 點(diǎn)擊次數： 1848次
ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗）是一種廣泛用于生物醫學(xué)研究和臨床診斷的技術(shù)。人elisa試劑盒是一套預先包裝好的組件，用于檢測特定蛋白質(zhì)或其他分子在樣本中的存在量。下面是使用人elisa試劑盒的詳細步驟：
步驟1：收集樣本
首先需要收集待測試的樣本。這可以是血液、尿液、唾液等生物樣本。將樣本放入試管中，并將其標記以避免與其他樣本混淆。
步驟2：稀釋樣本
對于某些樣本，如血清和血漿，需要進(jìn)行稀釋。這是為了確保樣本中含有足夠低的蛋白質(zhì)濃度，以避免在后續步驟中出現假陽(yáng)性結果。通常會(huì )用緩沖液稀釋樣品，使得樣品能夠被人elisa試劑盒所檢測。
步驟3：裝載試板
將96孔板插入孔板支架中，并將每個(gè)孔加入要測試的樣本或標準品。每個(gè)孔位都需要添加適量的綁定抗體，并進(jìn)行孵育反應。
步驟4：孵育
將孔板放入溫度控制器中，一般會(huì )將其孵育30-60分鐘，以便樣本中的蛋白質(zhì)與綁定抗體結合。在此過(guò)程中，可以通過(guò)輕輕震動(dòng)微板使物質(zhì)更充分地混合。
步驟5：洗滌
使用緩沖液或PBS洗滌孔板，去除不結合的物質(zhì)。通常需要洗滌2-5次，以確保所有不結合的物質(zhì)都已被清除。
步驟6：加入檢測抗體
將檢測抗體添加到每個(gè)孔位中，并進(jìn)行孵育反應。此抗體將與之前的綁定抗體結合，并形成一個(gè)復合物。這個(gè)復合物是將要檢測的蛋白質(zhì)、抗原或其他生物分子的檢測目標。
步驟7：再次洗滌
使用緩沖液或PBS洗滌孔板，去除不結合的物質(zhì)。
步驟8：加入底物
將底物HRP（過(guò)氧化物酶）添加到每個(gè)孔位中，并進(jìn)行孵育反應。復合物將與底物發(fā)生反應，產(chǎn)生顏色變化的信號。
步驟9：終止反應
在可見(jiàn)的顏色出現之前，及時(shí)添加停止反應的緩沖液。這會(huì )阻止進(jìn)一步產(chǎn)生顏色，并穩定復合物的信號。
步驟10：測量信號
使用讀數器或多光譜分析儀測量每個(gè)孔位的吸光度。吸光度與蛋白質(zhì)、抗原或其他生物分子的存在量成正比。根據標準曲線(xiàn)計算樣品中蛋白質(zhì)的含量。
人elisa試劑盒是一種用于檢測特定生物分子的快速、靈敏和可靠的方法。通過(guò)遵循以上步驟，可以使用人elisa試劑盒進(jìn)行高質(zhì)量的實(shí)驗并得到準確的結果。
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