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上海elisa試劑盒是如何進(jìn)行操作的?

發(fā)布時(shí)間: 2022-11-26  點(diǎn)擊次數: 938次
  上海elisa試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實(shí)驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結果判斷較客觀(guān)等因素,已廣泛應用在植物學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。
 
  上海elisa試劑盒的技術(shù)關(guān)鍵:
  1、細胞上清:前處理有必要把細胞離心去掉,每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時(shí),用標準品稀釋液直接稀釋?zhuān)?/div>
  2、腦脊液:前處理有必要把細胞離心去掉,每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時(shí),用標準品稀釋液直接稀釋?zhuān)?/div>
  3、血清血漿:請參與50ul樣本分析緩沖液后加50ul標本,如稀釋量大,請將樣本與樣本分析緩沖液等量參與,缺少部分用標準品稀釋液賠償至100ul;
  4、組織勻漿液的樣本,要制備過(guò)程中需要在緩沖液中參與蛋白酶抑制劑,防止蛋白成份被內源性蛋白酶降解,構成查看效果的值偏低。
 
  上海elisa試劑盒的實(shí)驗操作步驟:
  1、把試劑混勻,切記實(shí)驗時(shí)不要加理大量含有泡沫的液體,避免實(shí)驗產(chǎn)生誤差。
  2、跟數據測樣決定板條數。每個(gè)標準品和空白孔建議做復孔。每個(gè)樣品根據自己的數量來(lái)定,能使用復孔的盡量做復孔。
  3、加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔 加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
  4、甩去孔內液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
  5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
  6、甩去孔內液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
  7、每孔加入底物各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。一定要避免光照。
  8、取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
  9、在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。

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